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細胞簡介：

睪丸實質(zhì)由三層結(jié)構(gòu)組成的囊包繞：外層是鞘膜，中間為白膜，里面是血管膜。

睪丸的動脈供應(yīng)有三個來源：睪丸動脈及其分支、輸精管動脈和提睪肌動脈。在一些男性，超過 90%的睪丸血供來自睪丸動脈，睪丸血供的中斷可導(dǎo)致睪丸。間質(zhì)中的微血管稱為小管間血管，精曲小管周圍的梯狀微血管 稱為管周微血管。

細胞特性：

1）組織來源于人的正常睪丸組織。

2)細胞鑒定：VWF熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細胞生長方式：鋪路石樣，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 delf原代 內(nèi)皮 細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)基。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠成肌分化蛋白(MyoD)檢測試劑盒 ，英文名： MyoD ELISA Kit

Rat bladder tumor aigen (BTA) ELISA Kit 大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)檢測試劑盒

RatN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)檢測試劑盒 進口分裝

CLIAKitforCR(HumanCalretinin)ELISAKit人鈣結(jié)合蛋白

細胞氧化型(GSSG)濃度比色法定量檢測試劑盒50次

RatCyclin-D2ELISAKit大鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)檢測試劑盒

DKK1重組人 DKK1 / Dkk-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1(CCL3L1)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1 (CCL3L1)

CD1B & B2M重組人 CD1B & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

ABHD4 Protein Human 重組人 ABHD4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

NP Protein H2N2 重組甲型流感 H2N2 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) (His 標(biāo)簽)

趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1(CCL3L1)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1 (CCL3L1)

ABHD4 Protein Human 重組人 ABHD4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

DKK1重組人 DKK1 / Dkk-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

NP Protein H2N2 重組甲型流感 H2N2 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) (His 標(biāo)簽)

CD1B & B2M重組人 CD1B & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

魚脫酶2(DIO2)ELISA檢測試劑盒 ELISA 組裝/原裝

Human ai IgM aibody to hepatitis A virus (ai-HAV) ELISA Kit 人抗甲型肝病毒IgM抗體(ai-HAV)檢測試劑盒

swinemajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡELISAKit 豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)檢測試劑盒 進口分裝

ADVIgGVII腺病毒IgGⅦ型(間接法二步法)

血液乙醇脫氫酶III(S-亞硝基谷胱苷肽還原酶)活性比色法定量檢測試劑盒20次

MousesolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit小鼠可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)檢測試劑盒

人睪丸血管內(nèi)皮細胞愈創(chuàng)木酚   50g

Guaiacol   100g

鹽酸胍   100g

GuanidineHydrochloride   500g