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產品名稱:重組小鼠干擾素-γ,His標簽(IFN-γ)

產品特點:重組小鼠干擾素-γ,His標簽(IFN-γ)的相關產品:Endostatin 內皮抑素/內皮他丁抗原 0.5mgEndostatin 內皮抑素/內皮他丁抗原
CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a, His 標簽)
ACVR1B重組大鼠 ACVR1B / ALK-4 蛋白 (Fc 標簽)

產品型號:

更新日期:2024-11-19

訪問次數:501

重組小鼠干擾素-γ,His標簽(IFN-γ)的詳細資料:

產品僅供研究使用,不適用于人類或臨床診斷
商品屬性:

產品英文名稱:Mouse IFN-γ protein, His Tag

產品中文名稱:重組小鼠干擾素-γ,His標簽(IFN-γ)

規格:20 μg/500 μg/100 μg

貨號:EY-01X8614
用途:僅供科研研究實驗

特點&優勢:

分子:IFN-γ

標簽N-His

表達宿主:大腸桿菌

種屬:小鼠

序列:氨基酸序列來源于:鼠源 γ-IFN   (NP_P01580) (His23-Cys155)表達的蛋白片段,N端含有6xHis標簽。

活性:檢測其與配體的結合能力,檢測的實驗類型為功能性ELISA1 μg/mL的包被小鼠IFN-γ蛋白(100 μl/)可與小鼠IFNGR1結合,小鼠IFNGR1EC50144ng/mL

蛋白長度:重組小鼠 IFN-γ由154個氨基酸組成,預測的理論分子量為16.9 KDa,與SDS-PAGE結動?動

背景

干擾素(IFN)是一種廣譜抗病毒劑,并不直接殺傷或抑制病毒,而主要是通過細胞表面受體作用使細胞產生抗病毒蛋白,從而抑制乙肝病毒的復制,其類型分為三類,α-(白細胞)型、 β-(成纖維細胞)型,γ-(淋巴細胞)型;同時還可增強自然殺傷細胞(NK細胞)、巨噬細胞和T淋巴細胞的活力,從而起到免疫調節作用,并增強抗病毒能力。干擾素是一組具有多種功能的活性:蛋白質(主要是糖蛋白),是一種由單核細胞和淋巴細胞產生的細胞因子。它們在同種細胞上具有廣譜的抗病毒、影響細胞生長,以及分化、調節免疫功能等多種生物活性:

重組小鼠干擾素-γ,His標簽(IFN-γ)

本產品具有下列特點:

 1.操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發性的有機溶劑來溶解甲臜產物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數后可放回溫箱繼續孵育,使顏色進一步生成。
公司正在出售的產品:

Apaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1 0.5mgApaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1)(CT) 凋亡蛋白活性因子-1(抗原)

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IL1R1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL1R1 蛋白

操作步驟:

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質粒為模板,按基因序列設計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉錄形成cDNA第一鏈,以逆轉錄產物為模板進行PCR循環獲得產物。

(二)構建重組表達載體

1、載體酶切:將表達質粒用限制性內切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達質粒的表達菌種

1、 將連接產物轉化大腸桿菌DH5α,根據重組載體的標志(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作。否則應篩選更多克隆,重復亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。

3、 以此重組質粒DNA轉化表達宿主菌的感受態細胞。

(四)誘導表達

1、挑取含重組質粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養基的300ml培養瓶中, 37℃震蕩培養至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導的對照組,余下的加入IPTG誘導劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續37℃震蕩培養3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。


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