產(chǎn)品名稱：重組人核因子κ B受體活化因子配體RANKL
產(chǎn)品特點：重組人核因子κ B受體活化因子配體RANKL的相關(guān)產(chǎn)品：FRA1/FOSL1 peptide FRA-1多肽蛋白 1mgFRA1/FOSL1 peptide FRA-1多肽蛋白ADIPOQ Protein Human 重組人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 CD59重組大鼠 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白 Protein
產(chǎn)品型號：
更新日期：2024-11-19
訪問次數(shù)：345
重組人核因子κ B受體活化因子配體RANKL的詳細資料：
產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：
產(chǎn)品英文名稱：Huamn RANKL protein
產(chǎn)品中文名稱：重組人核因子κ B受體活化因子配體RANKL
規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg
貨號：EY-01X8674
用途：僅供科研研究實驗
特點&優(yōu)勢:
標(biāo)簽:無標(biāo)簽
表達宿主:大腸桿菌
種屬:人
序列:氨基酸序列來源于人源： RANKL (Ala142-Asp317)（O14788）表達的蛋白片段，C-末端帶有 6×His 標(biāo)記。
活性:通過其在 RAW264.7 細胞中誘導(dǎo)破骨細胞分化的能力來衡量。這種效應(yīng)的ED50<10 ng/mL。
蛋白長度：該蛋白質(zhì)的計算分子量為 20.67 kDa，在還原條件下，蛋白質(zhì)遷移為 17 kDa（SDS-PAGE 分析）。
純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測
采用 LAL 法檢測，每 1 μg 蛋白質(zhì)中的動?動
背景
NF-κB 受體激活劑（RANK）配體（RANKL）是 TNF 細胞因子超家族中的 II 型跨膜蛋白，其細胞外結(jié)構(gòu)域位于 TNF 細胞因子超家族的羧基端。RANKL 是一種 19.8 kDa 的蛋白質(zhì)，含有 317 個殘基，在 T 細胞和 T 細胞豐富的器官（如胸腺和淋巴結(jié)）中高表達。RANKL-RANK（RANKL 受體）在骨代謝、失調(diào)和免疫系統(tǒng)中發(fā)揮著重要作用。
本產(chǎn)品具有下列特點:
1.操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。
2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。
4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進一步生成。
操作步驟：
(一)獲得目的基因
1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。
2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。
(二)構(gòu)建重組表達載體
1、載體酶切:將表達質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。
2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。
(三) 獲得含重組表達質(zhì)粒的表達菌種
1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。
2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。
3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達宿主菌的感受態(tài)細胞。
(四)誘導(dǎo)表達
1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。
2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。
3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。
4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。
5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。
公司正在出售的產(chǎn)品：
Beta-Amyloid(1-16 0.5mgBeta-Amyloid(1-16) β淀粉樣肽1-16(多肽蛋白)
ITGA5 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA5 & ITGB1 Heterodimer 蛋白
CTLA4重組小鼠 CTLA4 / CD152 蛋白 Protein
ADAM17 Protein Rat 重組大鼠 ADAM17 蛋白
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽) Protein
豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat angiotensin conveing enzyme (ACE) ELISA Kit 大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)檢測試劑盒
Humanglomerularbasememembraneaibogy,GBMELISAKit 人抗腎小球基底膜抗體(GBM)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCyclophosphamide,CTX檢測試劑盒人環(huán)0酰胺(CTX)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20次
HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit人脊髓灰質(zhì)病毒IgG(PV-IgG)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人腸三葉因子(ITF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人Dickkopf1(DKK1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人11(KLK11)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人抑制素B(INH-B)ELISA 試劑盒
Human ansforming growth factor beta 2 (TGF beta 2) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒
HumanDickkopf1,DKK1ELISAKit 人Dickkopf1(DKK1)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanIerleukin11,IL-11檢測試劑盒人白介素11(IL-11)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織科薩基病毒A(CoxsackievirusA)定量PCR擴增檢測試劑盒20次
HumanIschemiaModifiedAlbumin,IMAELISAKit人缺血修飾白蛋白(IMA)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
重組人核因子κ B受體活化因子配體RANKLCTLA4重組小鼠 CTLA4 / CD152 蛋白 Protein
Beta-Amyloid(1-16 0.5mgBeta-Amyloid(1-16) β淀粉樣肽1-16(多肽蛋白)
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽) Protein
ITGA5 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA5 & ITGB1 Heterodimer 蛋白
ADAM17 Protein Rat 重組大鼠 ADAM17 蛋白
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