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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：小鼠心臟干細胞

英文名稱：Mouse Cardiac Stem Cells

組織來源：心臟組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

小鼠心臟干分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能。研究發(fā)現(xiàn)，心臟干細胞是一種多潛能細胞，具有再生和克隆能力，并可分化為心肌細胞、平滑肌細胞和血管內(nèi)皮細胞。體內(nèi)研究顯示，從心臟中分離出的心臟干細胞，經(jīng)體外簡單培養(yǎng)、增殖和標(biāo)記后，移植到心肌梗死邊緣區(qū)域，心梗血流動力學(xué)和心室壁厚度較對照組明顯改善，心肌梗死邊緣區(qū)域發(fā)現(xiàn)有標(biāo)記的心肌細胞、平滑肌細胞和內(nèi)皮細胞。盡管其新生心肌細胞較小，但表達一些特殊肌蛋白如心臟肌球蛋白重鏈、α-肌動蛋白、α-輔肌動蛋白、連接蛋白等，證實了心臟干細胞對心肌梗死的修復(fù)作用。干細胞移植治療是目前心肌梗死和缺血性心臟病細胞重建的主要方法，成體干細胞中的c-kit陽性心臟干細胞因其來源于心臟，有定向心臟細胞系分化的趨勢，體內(nèi)外可以分化成心肌細胞、血管內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞，同時自體移植不存在免疫排斥反應(yīng)及倫理問題已經(jīng)成為目前研究的熱點。短期內(nèi)獲得治療量的自體心臟干細胞是這一治療應(yīng)用于臨床的關(guān)鍵所在。因此，研究一種新的分離培養(yǎng)方法可在短時期內(nèi)獲得大量純度較高的自體c-kit陽性心臟干細胞成為目前干細胞領(lǐng)域研究的熱點問題之一。

公司實驗室分離的小鼠心臟干采用機械剪碎組織、膠原酶分次消化法結(jié)合差速貼壁、心臟干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的小鼠心臟干經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 長梭形

傳代特性 可傳2-3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠角蛋白18(K18)檢測試劑盒 ，英文名： K18 ELISA Kit

Mouse neuophil chemoatacta protein 2 (NAP-2/CXCL7) ELISA Kit 小鼠中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)檢測試劑盒

RatAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit 大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFishCoisolELISAKit魚類

細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-10)活性熒光定量檢測試劑盒20次

RatOsteopoin,OPNELISAKit大鼠骨橋素(OPN)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

ANGPT2重組小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白 Protein

堿性鞘0脂0酸二酯酶(Alk-Smase)重組蛋白 Recombinant Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase)

PLS3重組人 PLS3 / Plastin 3 蛋白 Protein

DOT1L Protein Human 重組人 DOT1L / KMT4 蛋白

CD8A Protein Ferret 重組雪貂 CD8A / CD8 alpha chain 蛋白

堿性鞘0脂0酸二酯酶(Alk-Smase)重組蛋白 Recombinant Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase)

DOT1L Protein Human 重組人 DOT1L / KMT4 蛋白

ANGPT2重組小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白 Protein

CD8A Protein Ferret 重組雪貂 CD8A / CD8 alpha chain 蛋白

PLS3重組人 PLS3 / Plastin 3 蛋白 Protein

小鼠抗鹽抵抗的酸性0酸酶(AP)檢測試劑盒 96T/48T

Human heat shock protein 60 (Hsp-60) ELISA Kit 人熱休克蛋白60(Hsp-60)檢測試劑盒

HumanPolySeriumAigen,PHSAELISAKit 人多聚血清蛋白(PHSA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanangiostatin,ANG檢測試劑盒人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物鈣調(diào)蛋白(CaM)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次

Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISAKit雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠心臟干細胞小鼠固   英文名稱：   Aldosterone   規(guī)格：      英文縮寫：   ALD

小鼠白蛋白   英文名稱：   Albumin   規(guī)格：      英文縮寫：   ALB

小鼠乙酰羧化酶   英文名稱：   Mouse Acetyl Coenzyme A Carboxylase   規(guī)格：      英文縮寫：   ACC

小鼠乙酰   英文名稱：   Mouse Acetylcholine   規(guī)格：      英文縮寫：   ACH

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用